葡萄中花青素定量技術新突破！
113年03月10日
【本篇報導由化學系 陳頌方教授研究團隊提供】 在本研究中，開發了使用聯苯固定相的QuEChERS和UHPLC-MS/MS方法，並用於葡萄中12種花青素的快速分離。實現了多種物質的高效分離單醣基化和非醣基化花青素。目標花青素的線性範圍為0.5-500 ng mL-1。重複性分析的同日內（intraday）和異日間（interday）精密度均低於11.8%。不同來源的葡萄中的花青素已成功定量。因此，所開發的QuEChERS和UHPLC-MS/MS方法成功地為葡萄中花青素的定量。 花青素（AnCS）分佈廣泛在植物組織中，它們主要分佈於花或果實中，也分佈於葉、莖和根。花青素具有生物活性並顯示出抗氧化和抗發炎特性，被認為能預防各種疾病，例如：神經系統以及心血管疾病。花青素主要來自天然產品，最常見的結構是單醣苷衍生物，在植物中含量相當豐富。這些結構源自花青素或花青素的醣苷化（AnCD），透過在基本基礎上添加醣基並透過醣苷鍵形成框架，以及不同程度的羥基化和甲氧基化。因此，結構花青素衍生性商品的差異是由於差異醣基化和醯化程度，這導致了多種醣基化模式和結構。雖然花青素在許多天然水果和蔬菜中的組成比較簡單，花青素的結構在葡萄卻很複雜。自然界中有很多類型花青素，而大多數這些衍生物並沒有可靠的標準品可供參考。因此，準確定量葡萄中的花青素含量仍然是一個挑戰。 在本研究中，使用QuEChERS萃取方法應用於花青素的定量。和之前超音波輔助萃取技術相比，研究團隊所開發的QuEChERS方法在測定葡萄中的花青素顯示出優異的靈敏度（sensitivity）。所開發的萃取和淨化（clean-up）程序簡單高效，使葡萄萃取物才能得到充分的淨化。此外，開發了一個新的液相層析方法，用於分離葡萄中的花青素。對於層析分離，發現聯苯（biphenyl）固定相，相較於傳統C18固定相，是更有吸引力的替代選擇。聯苯層析管柱實現了分離12種單醣基化和非醣基化花青素（如表1）。本研究所發展的方法具有快速沖提（elute）和縮短分析時間優勢，可用於葡萄萃取物的常規分析。 表1：開發的QuEChERS和UHPLC-MS/MS對商品葡萄中的花青素進行定量 原文出處：Yang, L. C., & Chen, S. F. (2022). Quantification of anthocyanosides in grapes by QuEChERS and biphenyl-UHPLC tandem mass spectrometry. Journal of Food and Drug Analysis,30(3), 382.https://doi.org/10.38212/2224-6614.3427